文章摘要
迟明 迟海峰 许波 晁玉瑾 郑楠 曹艳华 王曼秋 张国成.B19 病毒XA株VP1独特区蛋白对Hela细胞凋亡的影响[J].,2014,14(33):6446-6449
B19 病毒XA株VP1独特区蛋白对Hela细胞凋亡的影响
Effect of VP1-unique Region Protein of Parvovirus B19-XA on theApoptosis in Hela Cells
  
DOI:
中文关键词: VPlu基因  稳定转染  细胞凋亡  Caspase3
英文关键词: Vplu Gene  Stable transfection  Cell apoptosis  Caspase3
基金项目:国家自然科学基金项目(81070543)
作者单位
迟明 迟海峰 许波 晁玉瑾 郑楠 曹艳华 王曼秋 张国成 济南军区总医院儿科总参谋部老干部服务管理局卫生处天津武警儿童医院 
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中文摘要:
      目的:构建B19 病毒XA株VPlu 基因的真核表达载体和稳定转染细胞系,探讨B19 病毒XA株VPl 独特区蛋白对Hela 细 胞凋亡的影响。方法:采用本课题组前期构建的真核表达载体plRES2-EGFP-Vplu 及plRES2-EGFP 对照质粒,将其稳定转染至 Hela 细胞,通过流式细胞术检测EGFP 阳性细胞的比例以确定稳定转染的细胞系是否成功构建;提取稳定转染的Hela 细胞的总 蛋白,通过Western blot 检测细胞内凋亡相关基因Caspase3 的表达;转染plRES2-EGFP-Vplu 及plRES2-EGFP 的Hela 细胞经过 Annexin V和PI 的染色后,通过流式细胞术检测其凋亡率。结果:本实验成功构建了plRES2-EGFP-VPlu 稳定转染的Hela 细胞 系,plRES2-EGFP-Vplu 稳定转染的Hela 细胞中Caspase3 的表达较转染对照质粒的Hela细胞明显增加,细胞凋亡率亦显著升高, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:B19 病毒XA 株VP1 独特区蛋白能够显著促进Hela细胞的凋亡。
英文摘要:
      Objective:To clone VP1-unique region of parvovirus B19-XA and construct eukaryotic expression plasmid and stable transfection cell line, and explore the effect of VP1-unique region of parvovirus B19-XA on the apoptosis in Hela cells.Methods:plRES2-EGFP-VPlu constructed previously was used and transfected to Hela to construct a stable transfection cell line. Flow cytometry was used to detect the transfection rate, and western blot was used to detect the expression of caspase3. Hela cells transfected with plRES2-EGFP-Vplu and plRES2-EGFP were stained with Annexin V and PI and flow cytometry was used to detect the apoptotic rate.Results:A cell line stably expressed VP1-unique region of parvovirus B19-XA was successfully constructed. The expression of Caspase3 and apoptotic rate significantly incireased in the cell line stably expressed VP1-unique region of parvovirus B19-XA (P <0.05).Conclusion:VP1-unique region of parvovirus B19-XA could obviously promote the apoptosis of Hela cells.
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